咨询专家：如何能快速简单地鉴定不同的脂质类型？

作者：Seetaramanjaneyulu Gundimeda，安捷伦应用科学家

脂质组学是一个发展迅速的研究领域，重点关注脂质。诸如质谱 (MS) 等技术的发展，以及发现脂质谱与特定代谢疾病（例如肥胖、高血压、中风和糖尿病）关联密切，都大大扩展了脂质组学的应用领域。

脂质分析可由液质联用系统在正相或反相色谱模式下进行分析。脂质结构由两个重要组成部分构成：极性头部和疏水尾部。正如之前 Access Agilent 文章中解释过的，由甘油骨架形成的脂质称为甘油脂质。

甘油磷脂的特征离子可帮助其鉴定

长链脂肪酸可将甘油中的醇基酯化。当一个醇基与一个极性基团例如磷酸、胆碱磷酸、磷酸乙醇胺和磷酸丝氨酸连接时，它们被称为甘油磷脂。甘油磷脂在 MS/MS 谱图中的特征离子可帮助其鉴定。世界各地的脂质组学科学家都在使用这些特征离子进行脂质鉴定。表 1 中列出了其中几类脂质的诊断离子/特征。

表 1. 不同磷脂类型在 MS/MS 谱图中的诊断特征

图 1. 屏幕截图展示如何使用碎片质量数过滤器

利用碎片质量数过滤数据可简化脂质分析

鉴定混合物中的脂质时，不同磷脂类型的诊断特征信息十分重要。根据表 1 中的信息，采用 Agilent MassHunter 定性分析软件工具过滤数据，可大大简化脂质分析。“按碎片过滤结果”特征是其中的一种方法，可根据靶标碎片质量数或中性丢失过滤数据。只需点击“由自动 MS/MS 查找化合物”选项卡，即可编辑多种过滤设置。图 1 中展示了通过数据简化可在脂质混合物中鉴定神经酰胺。仔细查看色谱图后，需设置保留时间窗口和质谱阈值参数。碎片质量信息的准确度十分关键，这是因为质量数匹配的允许误差是根据数据的准确度设置的，从而大大影响数据结果。通过改变碎片质量数过滤器为 184.073，相同的工具可用于鉴定含有胆碱磷酸的脂质。

图 2. 屏幕截图展示如何使用中性丢失过滤器

利用中性丢失过滤数据还可帮助鉴定脂质

类似地，还可使用特征中性丢失鉴定脂质。磷脂酰胆碱 (PC) 在正离子模式下的 MS/MS 谱图中有一个主要的离子 m/z 184。在负离子模式下，其甲酸盐加合物具有特征性的中性丢失 60 Da，或其乙酸盐加合物的特征性中性丢失 74 Da。磷脂酰乙醇胺 (PE) 在负离子模式下有特征离子 m/z 140 和 m/z 196。但在正离子模式下，它们的主要特征离子是母离子中性丢失 141 Da。根据数据采集时的离子化模式的不同，采用碎片离子和中性丢失进行过滤对简化数据都很重要。前列腺素是另一种脂类，可由“中性丢失过滤器” 100.09 Da 进行鉴定（图 2）。

采用相关诊断特征处理数据，最终生成化合物列表。化合物列表可导出至任意谱库用于化合物鉴定。如需了解更管有关该应用的信息，请查看安捷伦出版物 5991-6959EN。

安捷伦提供大量的设备和软件帮助实现快速、准确的脂质分析

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文章目录 — 2016 年 8 月