免疫反应 

考虑到目前的疫情程度,世界各地的研究人员竞相寻找 SARS-COV-2 疫苗也就不足为奇。目前正在研究四类主要候选疫苗,而这些方法的共同点是均使用色谱和质谱进行表征。

在本文中,我们将看到各类疫苗的实例,其中色谱分离用于实现疫苗表征。


病毒疫苗

示例:麻疹疫苗、脊髓灰质炎疫苗 

前提:病毒疫苗采用弱化或减毒的病毒形式来制造疫苗。这些弱化的病毒不会造成个体患病,但暴露于人的免疫系统时,仍然可以引发免疫反应。如果日后该个体遇到病毒的完全活性形式,则会出现对病原体的免疫系统记忆(即免疫力)。 

所用方法:Shin 等人的论文描述了使用体积排阻色谱 (SEC) 从解体的衣壳蛋白中分离完整病毒颗粒,并使用离子交换色谱 (IEX) 进一步纯化产物。

疫苗开发 

病毒载体疫苗

示例:埃博拉疫苗

前提:使用病毒作为载体,通过基因工程改造,由另一种病原体生产蛋白质以建立免疫力。载体可以为复制型,也可以为非复制型。

所用方法:Wang 等人使用一种 IEX,即阴离子交换色谱 (AEX) 来确定完整和空的 AAV6 衣壳。

加利福尼亚大学的 Emily C. Hartman 报告了使用体积排阻色谱,对基于病毒衣壳的药物递送载体的所有单个氨基酸变异进行定量表征。


核酸疫苗

示例:尽管目前尚无经过许可的人用疫苗采用这种方法,但 20 多个研究团队正在对此类疫苗进行研究。  

前提:这项技术使用可编码引起免疫反应的蛋白质的病原体 DNA 或 RNA 物质。

所用方法:在一篇对 DNA 疫苗纯化技术的综述中,堪培拉大学的一个团队介绍了从亲和色谱柱到疏水相互作用色谱 (HIC) 的一系列技术,用于纯化疫苗的 DNA 质粒。

由 Catherine Lancaster 领导的另一个研究团队对基孔肯雅热病毒糖蛋白的 N-糖模式进行了表征,与 SARS-CoV-2 刺突糖蛋白所需的工作类似。现可通过商业化释放多聚糖试剂盒,以确保最高水平的重现性与进一步工作的速度。

疫苗开发 

基于蛋白质的疫苗

示例:乙型肝炎疫苗、人乳头瘤病毒 (HPV) 疫苗  

前提:这些疫苗通常基于病毒蛋白亚基或病毒样颗粒 (VLP),通过蛋白直接注射到体内而发挥作用。这使得身体能够识别并启动对蛋白质(而不是整个病毒)的免疫反应。  

所用方法:Santana 等人展示了使用体积排阻色谱 (SEC) 分析基于蛋白质的疫苗,他们使用 BioSec-3 技术确定用于流感疫苗的新型血凝素 (HA) 活性形式的含量。 

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