Access Agilent 电子期刊（2017 年 1 月）

技巧：从 UHPLC 分析中获得最大价值

Stephen Luke，液相色谱柱产品经理

超高效液相色谱 (UHPLC) 用于实现两个主要目标：通常使用短色谱柱实现快速分离，或使用较长色谱柱实现高分离度分离。本文提供了有关最大程度改善 UHPLC 分析的技巧和示例。

图 1. 在超快速分离中，使用 Agilent InfinityLab Poroshell 色谱柱 (1a) 可提高分析效率，利用高分离度分离 (1b) 可实现更高的准确度

为什么选择 UHPLC？

更快速的分离可提高通量并降低每个样品的分析成本（图 1a）。改善的分离度提高了分析结果的准确度和精密度，如图 1b 所示，有助于减少所需的重复工作量。

成功实施 UHPLC 分析的要求

对成功实施 UHPLC 分析的关键要求是具有高色谱效率，但是提高效率会带来相应的后果。

高效色谱峰的定义是峰宽窄（特别是使用窄内径 (id) 色谱柱时），且峰体积小。为保持高效色谱峰，必须使用足够快的检测器采样速率并最大程度减小仪器扩散体积。技巧：利用小体积（短、窄内径）毛细管、零死体积接头和小体积流通池，可最大程度减小扩散体积。

示例：填充小粒径 (< 2 µm) 的液相色谱柱提供了高柱效，但产生了较高的压力。这意味着色谱柱和仪器必须能够耐受高压，通常为 1000 bar (~15,000 psi) 及更高。在高压下，摩擦生热发生于色谱柱中。窄内径色谱柱用于减轻径向温度梯度引起的分离影响。使用表面多孔颗粒 (SPP) 而非全多孔颗粒 (TPP) 可产生更高的柱效。 1.9 µm SPP 产生的柱效通常为 1.8 µm TPP 的 120%。

图 2. SPP UHPLC 色谱柱在 1000 bar 条件下的使用寿命测试

图 3. Agilent InfinityLab Poroshell 120 色谱柱为日常实验室运营提供了高价值和效率

色谱柱寿命在 UHPLC 中至关重要

选择正确的色谱柱对于 UHPLC 分析获得最佳价值至关重要。无法在高压下保持高柱效的色谱柱需要频繁更换。

技巧：新型 Agilent InfinityLab Poroshell 120 1.9 µm 色谱柱所用的创新颗粒和装填技术使其能够在 UHPLC 条件下提供较长的使用寿命。

图 2 的曲线显示了四种 UHPLC 色谱柱（包含 SPP）在 1000 bar UHPLC 条件下的柱效随进样次数的变化。

大量测试表明，相比于其他 SPP 色谱柱具有更长的色谱柱寿命，完成相同工作量所需的色谱柱可减少 10 倍。此外，较长的色谱柱寿命减少了由于色谱柱发生故障所引起的中断和所需的重复工作相关联的成本。在进行长期评估时，这些因素对实验室具有重要的经济意义（图 3）。

快速简便的方法开发

Agilent InfinityLab Poroshell 120 1.9 µm 色谱柱具有多种化学键合相，提供各种选择性，使方法开发快速简便。提供的化学键合相之一为 HPH-C18，该键合相在更宽流动相 pH 条件下具有更长的使用寿命。

完全可扩展的颗粒系列

通过引入 1.9 µm 颗粒，InfinityLab Poroshell 120 色谱柱现在提供完全可扩展的颗粒系列。这一更宽的范围意味着您可以选择最适合您的分离需要且最兼容您的液相色谱仪的粒径。

粒	适用范围	最大压力
1.9 µm	Highest UHPLC performance	1300 bar
2.7 µm	在较低压力下获得 UHPLC 性能	600 bar
4 µm	Improved HPLC performance	600 bar

利用 Agilent InfinityLab 液相色谱系列产品将柱效和可靠性提升至全新水平

Agilent InfinityLab产品组合经过专门优化，包括液相色谱仪、色谱柱和备件，可实现无缝协同工作。不管是在哪个应用领域，InfinityLab 一体化解决方案都可在您的液相色谱工作流程中实现最高效率。如需了解有关 Agilent InfinityLab 和新型 InfinityLab Poroshell 120 1.9 µm 色谱柱的详细信息，请浏览我们的资源页面，其中包括信息丰富的产品样本和免费资料包。.