Seahorse XF ATP
您一直在寻找的 ATP 速率测定方法
测定细胞的总 ATP 水平能为您提供一些信息。然而,如果不了解生成速率或通路贡献,则可能会失去对细胞增殖、分化、活化和死亡的重要见解。
您可以利用安捷伦 Seahorse XF 实时 ATP 速率检测方法检测重要变化。现在,您可以利用免标记技术同时测定活细胞中两个关键能量通路(糖酵解和线粒体呼吸)的 ATP 生成速率。与传统的终点总 ATP 测定不同,这种实时双通路动态定量提供了具有通路贡献指标的细胞生物能量代谢的动态图像,能够更早得到比其他细胞分析技术更深入的见解。
定量糖酵解和线粒体呼吸通路的 ATP 生成速率。
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监测药物或化合物处理的 ATP 生成速率动态响应。
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安捷伦 Seahorse XF 实时 ATP 速率测定的关键结果。A:阐明从线粒体呼吸到糖酵解的定量代谢转变,得到不同条件下的不同表型。B:展示一个细胞群在一段时间内线粒体呼吸 ATP 和糖酵解 ATP 生成速率的变化。查看白皮书了解如何获得这些测定结果。
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+ 获得全新视角 — ATP 是什么,测定方法有哪些?
细胞能量代谢是细胞表型和功能的基本驱动因素。这种能量由糖酵解和/或线粒体呼吸以 ATP 的形式产生,是所有细胞活动的必需物质。您可以利用安捷伦 Seahorse XF 实时 ATP 速率测定同时测定和定量活细胞中这两种通路的 ATP 生成速率。ATP 生成的动态定量为测量细胞功能提供了一种强大的新方法。
+ 测定 ATP 生成速率 — 超越 ATP 水平测定
超越终点总 ATP 测定,获得 ATP 动态变化的新视角
细胞 ATP 水平通过一个高度调控的系统维持稳定,该系统使细胞通过改变 ATP 生成速率以响应 ATP 需求变化,从而在生理条件下使细胞 ATP 水平维持稳定。尽管如此,测定总 ATP 水平的方法无法提供有关细胞活动和能量需求的动态信息。
ATP 生成的实时定量分析提供了一种信息更丰富的方法,能够评估基因修饰、化合物处理和/或其他任意类型干预对能量代谢与细胞功能相互作用的影响。
速率测定提供了超越终点总 ATP 水平测定的细胞动态的独特见解
A549 细胞暴露于莫能菌素(一种 Na+ 离子载体)时,XF 实时 ATP 速率测定方法测得 ATP 生成速率增加了 25%,这是由于 Na+ 输入增加,Na+/K+ ATP 酶活性随之增加。A459 细胞暴露于环己酰亚胺(翻译过程中的一种肽链延长抑制剂)时,由于 ATP 需求减少,ATP 生成速率降低了 20% 左右。
在两种情况下,由标准发光总 ATP 测定法测得的细胞 ATP 水平未发生变化。这表明,与静态总细胞 ATP 测定相比,测定 ATP 生成速率对于监测细胞功能动态和代谢是一种信息更丰富的方法。
+ 得到明确表型 — 同步定量两条 ATP 通路响应
利用细胞能量代谢的明确测定定量代谢转换和通路
代谢转换揭示了细胞通过另一代谢通路补偿某通路减弱或丧失的功能,以此满足细胞活动的能量需求。Seahorse XF 实时 ATP 速率测定提供了完整的细胞能量代谢谱以及相关线粒体和糖酵解通路的生成速率,使研究人员可定量调节剂引起的代谢转换,或揭示通路/底物依赖性。
两种能量产生通路的同时定量提供了相关转换数据
在正常培养条件下,MCF7 细胞通过线粒体呼吸获得约 70% 的 ATP。当低浓度调节剂 UK5099 部分抑制线粒体呼吸时,糖酵解 ATP 生成速率代偿性增加。这一代偿机制使总 ATP 生成速率保持恒定,以满足细胞活动的能量需求。
当降低葡萄糖浓度并提供半乳糖时,MCF7 细胞抑制糖酵解 ATP 生成,转而提高线粒体呼吸 ATP 生成速率以代偿糖酵解的损失。
+ 依赖于经过验证的方法 — 分析设计与 XF 报告生成器
技术
全新 Seahorse XF 实时 ATP 速率测定利用 XF 技术检测线粒体耗氧率 (OCR) 和糖酵解细胞外酸化率 (ECAR)。然后使用经过验证的算法将二者转化为线粒体呼吸 ATP 和糖酵解 ATP 生成速率。该测定方法通过依次注入能量代谢通路调节剂(寡霉素以及鱼藤酮和抗霉素 A 的混合物)去除非 ATP 生成相关信号的贡献。以这种方式,可以实现线粒体呼吸 ATP 和糖酵解 ATP 生成速率以及总 ATP 生成速率的准确测定。
Seahorse XF 实时 ATP 速率测定报告生成器是一款功能强大的数据分析工具,与测定试剂盒一起提供。原始数据可以导入数据分析工具并自动处理。最终数据通过组织形成可共享且易于理解的摘要报告,附带可发布的图表。图表示例包括堆积条形图 (A)、能量图 (B)、XF ATP 速率指数 (C) 和 ATP 生成速率(总 ATP、糖酵解 ATP 和线粒体呼吸 ATP)的动态迹线 (D)。
了解现可以为您的研究带来的优势
- 适合安捷伦 Seahorse 分析仪 XFe96、XF96、XFe24 和 XFp 型号的易于运行的测定方法
- 用于测试后分析的集成式数据处理工具
- 优化的一次性形式试剂可简化工作流程并降低测试复杂性
了解有关检测剂盒及购买选项的更多信息
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探索不同研究领域的潜力
近年来,免疫细胞中的能量代谢已成为深入研究的焦点,其揭示了代谢通路与免疫反应之间的紧密联系。安捷伦 Seahorse XF 技术使研究人员能够实时了解能量代谢在免疫反应和调控中的作用。
了解 Seahorse XF 实时 ATP 速率测定如何用于研究免疫细胞调控和谱系定向。
细胞代谢的改变是癌症的一个标志,多年来一直是癌症研究的关键驱动因素。安捷伦 Seahorse XF 技术可实时测定糖酵解和线粒体活性的变化,使研究人员能够了解癌细胞中代谢重编程的发生方式和原因。
了解如何将 Seahorse XF 实时 ATP 速率测定用于分析癌细胞的代谢表型,并将癌症行为与能量代谢联系起来。
新一代免疫细胞疗法需要新一代的分析工具。
一款安全、有效且持久的免疫细胞产品依赖于开发人员对各种免疫细胞功能的综合利用:激活、增殖、细胞命运、细胞毒性杀伤、免疫调节和记忆。所有这些都必须在不断变化的抑制性和毒性肿瘤微环境中完成。
+ 全球技术支持
美国与加拿大
1-800-227-9770;选 3 再选 8
1-800-227-9770;选 3 再选 8
欧洲
英国:0800 096 7632
德国:0800 180 66 78
荷兰:0800 022 7243
欧盟其他国家/地区:+45 3136 9878
英国:0800 096 7632
德国:0800 180 66 78
荷兰:0800 022 7243
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仅供科研使用。不用于临床诊断用途。