BL21-CodonPlus 感受态细胞

Agilent BL21-CodonPlus 感受态细胞通过克服密码子偏好性，显著提高蛋白质在大肠杆菌中的表达量。某些密码子在大肠杆菌中一般极少表达，若使其强制性高表达，就会导致大肠杆菌内部的tRNA库被耗竭，从而发生密码子偏好性。这种情况通常会导致蛋白合成减少、多肽链提前终止，或表达蛋白质中的氨基酸错误掺入。BL21-CodonPlus 感受态细胞来源于安捷伦的高性能 BL21-Gold 感受态细胞系。这些细胞能实现异源蛋白质在大肠杆菌中的高效高水平表达。

克服密码子偏好性后，无需进行定点突变或在真核生物表达系统中表达蛋白，因此节省了时间和人力。L21-CodonPlus 感受态细胞来源于 BL21-Gold 细胞，该细胞经过设计含有基因的额外拷贝，这些基因可编码这些罕见大肠杆菌密码子的 tRNA。增加这些 tRNA 后，有助于在 BL21-CodonPlus 感受态细胞中高水平表达多种异源重组基因。大肠杆菌中异源蛋白质的高效生成常常受到某些 tRNA 稀有性的限制，而这些 tRNA 在产生异源蛋白质的有机体中很丰富。强制性高水平表达异源蛋白质会耗尽稀有 tRNA 库，阻碍翻译。


BL21-CodonPlus 感受态细胞还具有安捷伦最高效感受态细胞株 XL10-Gold 中存在的 Hte 表型。Hte 表型的存在提高了细胞的转化效率。此外，编码核酸内切酶 I (endA) 的基因已在这些细胞中去活，这种酶能够快速降解由多数 miniprep 步骤分离的质粒 DNA。这两个特征实现了多种蛋白质表达构造子的直接克隆。