Access Agilent 电子期刊，2016 年 3 月

Agilent 1290 Infinity II RID 可实现高分离度和快速的聚合物表征

Graham Cleaver，安捷伦 ELSD/GPC/RID 业务开发经理

随着提高通量和降低成本的压力不断增大，凝胶渗透色谱 (GPC) 专家需要在实验室操作中获得更快的分析速度、更出色的分离度和更低的成本。

为应对这些挑战，安捷伦在 1290 Infinity II 平台中增加了一款新型微量流通池示差折光检测器。最近在 2016 年 1 月 1 日推出的检测器和 Agilent Infinity II 系统经过优化，能够在五分钟内提供高分离度聚合物分离。它不仅能够使运行时间缩短 70%，还能使溶剂消耗量减少 50%，从而大大降低样品分析的成本。

与 Agilent 1290 Infinity II 系统相关的所有性能特性和优势与高线性范围混合孔径色谱柱相结合，能够提供准确的分子量和分布图，与微量模式和分析模式下获得的结果十分一致。下文将对这些功能进行验证。

微量检测意味着更高的分离度

图 1. 快速高分离度分析

配备 Agilent 1290 Infinity II 示差折光检测器的 Agilent 1290 Infinity II 系统可提供优异的基线稳定性，这对于获得准确、可重现的分子量至关重要。GPC 几乎总是遵循等度分离机制，但是多功能 1290 Infinity 平台还具有在同一系统上运行 HPLC 应用、微量 GPC 和分析型 GPC 的能力。

结合低系统死体积与 2.5 µL RI 流通池可以获得比分析型 GPC 相比更高的性能。

图 1 显示了两种具有相对较低分子量的聚苯乙烯标准品。已证明利用传统 GPC 能够实现一定程度的低聚物分离。可通过分子量分布图鉴定出包括五聚体（最大）在内的低聚物。

图 2. Agilent 1290 Infinity II 微量 GPC 解决方案在五分钟内即可实现分离

利用微量检测技术提高样品通量

缩短分析时间有各种优点，因为能够对更多的样品进行色谱分析和处理（图 2）。溶剂成本可大幅降低，但不会损害准确度和重现性。

在分析模式中，利用 300 × 7.5 mm 色谱柱需要花费 30 分钟才可实现分离。微量检测 GPC 能够将运行时间缩短至五分钟内。

图 3. 使用混合孔径技术减少了错位、峰伸舌和拖尾

利用混合孔径填料技术获得准确、可重现的分子量分布

在 GPC 中使用单一孔径色谱柱常常出现问题，因为可能出现假峰，并且由于校正曲线“不匹配”而造成计算的分子量平均值的精密度降低。Agilent PlusPore 色谱柱通过使用混合孔径填料技术消除了峰伸舌、拖尾和错位问题，从而解决了这一难题（如图 3 所示）。

请注意，在三个不同的色谱柱组上对窄分布聚苯乙烯进行了色谱分析，证实“微量模式”中获得的结果与分析模式中的结果一致。

在本例中，4 根 PLgel 色谱柱为标准分析型 300 × 7.5 mm 混合柱床色谱柱，因此得到了更长的保留时间。向下移至微量模式时，保留时间 (Tr) 缩短，并且峰分离度 (Rs) 保留在可接受的实验误差内（表 1）。

色谱柱：	Tr（峰 2）	分离度	N/m（峰 2）	a	峰面积 (%)	峰高 (%)
4 x PLgel	28.46	1.22	5653	1.05	8	7
3 x PL Rapide L	7.41	1.13	23727	1.06	7	7
2 x ResiPore	6.66	1.10	14510	1.05	8	8

表 1. 标准和微量模式色谱分析结果

表 2 示出了由包含两个聚合物标准品的样品获得的分子量，这两种聚合物标准品得到了基线分离。由于本实验中所有色谱柱组均使用具有线性校准曲线的 PS/DVB 树脂，在传统分析级模式下获得的结果与使用混合孔径色谱柱和微量级示差折光检测器所得到的结果具有非常出色的一致性。分析级方法可直接转换为微量级方法，以获得更短的运行时间，同时保持分子量测定的准确度。

	Mp	Mn	Mw	PD	Mp	Mn	Mw	PD
	峰 1				峰 2
计算平均值	110262	107964	111181	1.03	56041	51015	53208	1.05
%RSD	3	1	1	0	5	8	5	4

表 2.使用具有线性校准曲线的 PS/DVB 树脂色谱柱组分析包含两个聚合物标准品的样品获得的分子量

表 3. 在凝胶渗透色谱的微量分析模式下只需使用较少的溶剂

利用微量分析大大节省分析成本

从分析模式转换为微量分析模式后，减少了所需的溶剂体积，从而大大节省了成本，并且具有显著的环境效益。表 3 示出了分析时间缩短 70% 并且溶剂消耗量减少 55% 的方法。通过换用孔径更窄的色谱柱，还可节省更多成本。

微量 GPC 能够提供更短的运行时间、提高重现性并获得更高的准确度

Agilent 1290 Infinity II 示差折光检测器提供了更低的流通池体积、扩散极低的管线、多孔径色谱柱技术和软件，所有这些均来自同一供应商。应用、服务和技术支持可最大限度延长系统正常运行时间，并且微量配置可提供准确、可重现的结果。另外，较短的运行时间能够获得高样品通量，且不影响结果的重现性或准确度。Agilent 1290 Infinity II 系统还具有极低的系统扩散，可确保保持分离度、缩短运行时间同时显著降低成本。此外，能够在同一系统上实现微量级、分析级和等度 HPLC 分析。