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Access Agilent 电子期刊,2015 年 2 月

来自安捷伦和 Immunalysis 的快速、非侵入式唾液检测解决方案

作者:Christine Moore
Immunalysis 公司研发副总监

和 Tom Gluodenis
安捷伦全球法医行业经理

唾液分析逐渐成为一种检测毒品的可靠方法。工作场所毒品检测、学校课程和刑事司法系统均已接受唾液测试,与血液和尿液测试相比,该方法具有多种显著优势。该技术具有简单、快速、无创以及可观察样本采集方法的优势,即使在酒醉时仍可采集证据。唾液中的毒品水平与血浆中的毒品水平有一定的相关性,检测窗口期为一到两天即表明近期服用了毒品。此外,该方法很难掺假,并且通常可检出母体毒品。最后,改进的唾液检测技术扩展了其在毒品检测中的应用。

安捷伦通过与 Immunalysis 公司合作,共同开发了第一个端对端工作流程,可检测唾液中 11 类 100 多种不同的毒品。所有工作流程均包含在免费的安捷伦应用文集中,即唾液中的毒品和代谢物分析:免疫筛查与LC/MS/MS 确认和定量。该 100 页的文集包括了多种常规滥用药物及合成大麻素和二类处方药的分析方法。本文中,我们主要讨论其中的一种实验方案。

快速、简便检测唾液中的合成大麻素

香料是几种合成大麻素的通用名称。其中多种被美国禁毒署及世界上的多个机构所禁用。这些化合物可导致心动过速(心跳加快)、癫痫、高血压、胸痛、心悸及幻觉。中毒症状通常持续时间不超过 2 至 4 小时,并且通常没有持久、残留的不良影响。但是,长期影响并不明确,虽然例如 JWH-018 可能会诱发脆弱个体精神疾病。

我们利用 Quantisal™ 唾液采集设备开发并验证了一种试验流程 [1]。该采集设备包括一个含有传输缓冲液的管子,以及一个吸水垫,供者可将他/她的嘴放置在上方以采集唾液。

样品前处理中使用 Agilent Bond Elut Plexa 固相萃取小柱。使用 Agilent ZORBAX Extend-C18,2.1 mm x 50 mm,1.8 µm 液相色谱柱进行分离。由于唾液分析的液质方法正在逐渐受到重视,且常为强制性的,因此我们使用了 Agilent 6430 三重四极杆液质联用系统

对于该实验方案,开始我们先利用七种合成大麻素对实验设计进行验证(表 1)。

 

合成大麻素

JWH-018

JWH-073

JWH-200

JWH-250

CP 47497

CP 47497 C8

HU-210

LOQ (ng/mL)

0.5

0.5

0.5

2

0.5

2

5

 

日内不精密度 (%)

4 ng/mL

3.9

3.6

5.0

3.4

4.9

3.9

8.6

40 ng/mL

2.2

2.1

6.0

2.0

4.1

4.3

5.6

 

日间不精密度 (%)

4 ng/mL

8.8

9.6

6.2

11

7.7

11

10

40 ng/mL

8.5

7.9

6.2

11

10

11

12

 

吸水垫回收率 (%)

4 ng/mL

65.5

67.4

85.0

66.5

77.7

76.0

86.4

40 ng/mL

70.6

61.4

81.4

75.1

71.3

78.2

75.7

基质效应 (%)

-55

-45

-55

-73

-64

-55

-49

过程效率 (%)

40

51

56

24

38

45

51

表 1. 采用 Immunalysis 公司的采集垫及安捷伦的样品处理和 LC/MS/MS 分析唾液中的合成大麻素所得的验证结果

接下来,我们采用相同的实验设置,评估了合成及天然大麻素的回收率,结果如表 2 所示。

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图 1. 两个不同受试者的唾液中的合成大麻素;BP 为 Blueberry Posh,BM 为 Black Mamba

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图 2. 香料吸食者吸食 40 分钟后唾液样品的 MRM 色谱图。下图显示了 ± 20% 离子比限值的 LOQ

毒品

吸水垫回收率 (%)

4 ng/mL

40 ng/mL

JWH-018

65.5

70.6

JWH-073

67.4

61.4

JXH-200

85.0

81.4

JWH-250

66.5

75.1

CP 47497

77.7

71.3

CP 47497 C8

76.9

78.2

HU-210

86.4

75.7

四氢大麻酚

89.4

 

9-羧基四氢大麻酚

 

80.1 (10 ng/mL)

2-羧基四氢大麻酚

78.2

 

大麻酚

79.7

 

大麻二酚

71.9

 

表 2. 采用 Immunalysis 公司的采集垫所得不同浓度的合成及天然大麻素的百分比回收率

然后我们测试了可合法购买的两种香料样品,品牌名分别为 Blueberry PoshBlack Mamba。毒品由两个不同的受试者吸食,在吸食前和吸食后分别采集唾液样本,间隔达 12 小时。样品在 4 °C 下保存一年,待进一步分析。

单次吸食 Blueberry Posh 12 小时后,唾液中仍可检测出 JWH-018 成分。该吸食者的样品在缓冲液中冷藏保存一年,其浓度几乎相同。但是,在吸食 Black Mamba 的吸食者样品中,浓度发生了降解(降至很低水平),如图 1 所示。图 2 展示了吸食 Blueberry Posh 的唾液样品的 MRM 色谱图。

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参考文献

  1. Quantisal™ 唾液毒品测试是美国 Immunalysis 公司的产品

图 1.

两个不同受试者的唾液中的合成大麻素;BP 为 Blueberry Posh,BM 为 Black Mamba(Coulter, C., Garnier, M., Moore, C. J. Anal. Toxicol. 35: 424–430, 2013.

图 2.

香料吸食者吸食 40 分钟后唾液样品的 MRM 色谱图。下图显示了 ± 20% 离子比限值的 LOQ