Access Agilent 电子期刊(2014 年 2 月)
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轻松将 Waters Acquity UPLC 和 Shimadzu Prominence HPLC 方法转换至 Agilent 1290 Infinity 液相色谱
作者:Christian Gotenfels
安捷伦液相色谱高级产品经理
对于需要分析人员将 HPLC 和 UHPLC 方法在不同部门和地点之间进行转换的各个实验室而言,能够进行仪器之间的方法转换是一项非常重要的能力。尤其在严格监管的环境中(例如制药行业的质量控制),液相色谱方法的转换可能会比较棘手,因为必须避免对原始方法作出任何修改。幸运的是,Agilent ISET(智能化系统模拟技术)能够帮助您解决这些方法转换问题,让您能充分利用最新的液相色谱技术。
哪些参数会影响方法转换?
诸如分析能力范围、延迟体积、混合行为、温度控制、柱外体积和检测器流通池等液相色谱仪间的设计差异均会影响将方法从一个系统转移到另一个系统的能力。从老式 HPLC 平台(如 Shimadzu Prominence HPLC)转换至最新 UHPLC 技术往往会导致保留时间和色谱分离度发生改变(图 1)。在采用不同泵混合原理的系统之间进行方法转换也可能会非常困难,如图 2 所示。
延迟体积和梯度混合的影响
液相色谱系统的延迟体积决定了梯度多快到达色谱柱。而混合行为将影响梯度曲线。例如,Waters Acquity UPLC H-Class 系统具有小于 400 µL 的延迟体积,同时,洗脱液会在泵的低压侧混合在一起。相比而言,采用高压混合的 Agilent 1290 Infinity 二元泵液相色谱系统的延迟体积小于 140 µL。方法转换的结果是保留时间和色谱分离度发生改变(参见图 2 中的上部和中部色谱图)。图 2 中的上部和中部色谱图表明尽管存在这些差异,但还是实现了可靠的方法转换。
针对仪器之间方法转换的解决方案:采用 ISET 技术的 Agilent 1290 Infinity 液相色谱
安捷伦智能化系统模拟技术 (ISET) 使得 Agilent 1290 Infinity 二元泵液相色谱和 1290 Infinity 四元泵液相色谱成为适应性最强的 UHPLC 系统。ISET 允许您执行任何传统 HPLC 方法或最新 UHPLC 方法并可获得相同的色谱结果,无需更改原始方法或修改仪器硬件。
ISET 技术基于安捷伦的两大创新:一流的性能和革命性的模拟算法。
一流的性能
Agilent 1290 Infinity 液相色谱具有较宽的分析能力范围、无与伦比的流速及混合准确度、超低的延迟体积和卓越的灵敏度,可满足 ISET 应用的关键需求。
革命性的模拟算法
凭借对目标液相色谱行为的准确掌握和 Agilent 1290 Infinity 液相色谱的高准确度,ISET 能够创造出一种模拟能力,提供与所选仪器相同的梯度条件。您可以看到保留时间或分离度未发生改变。
方法开发和 QA/QC 都能获得更高的效率并节省费用
凭借 Agilent 1290 Infinity 液相色谱和 ISET,用户可以利用 UHPLC 性能加速方法开发,然后通过模拟目标系统对方法进行微调。使您对方法按预期运行充满信心。为了避免 QA/QC 过程中存在的方法转换问题,只需轻点鼠标即可模拟开发原始方法所用的液相色谱系统。然后用 ISET 运行继承的方法并同时充分利用 Agilent 1290 Infinity 液相色谱的 UHPLC 级分析速度、分离度和灵敏度。
如果您需要现代的 HPLC 性能并且不再想维护陈旧的传统液相色谱系统,请了解关于安捷伦智能化系统模拟技术的详细信息并观看视频。
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图 1.
农药分析
2.1 mm × 50 mm Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 柱,3.5 µm
0.8 mL/min,5% - 95% 乙腈-水,5 min,40 °C
将方法由 Shimadzu Prominence LC-20AT(上图)转换至采用 ISET 技术的 Agilent 1290 Infinity 四元泵液相色谱(下图)后表现出基本一致的色谱性能