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Access Agilent 电子期刊,2013 年 11 月

A PEEK inside Agilent Bio-inert capillaries

作者:Katja Kornetzky
安捷伦液相色谱备件产品经理

在生物色谱分析应用中,毛细管和接头都必须是惰性的,使其与蛋白质样品的相互作用降至最低。 许多蛋白质容易与金属发生相互作用。 例如,许多蛋白质具有螯合作用,某些酶促过程会使用金属作为催化剂。 在有铁存在的条件下,某些敏感化合物容易发生降解。 毛细管还必须具有较高的稳定性,可耐受苛刻的溶剂条件,例如现场清洗 (CIP) 程序中使用的溶剂,这些溶剂中含有强酸或强碱。 此外,离子交换色谱中所用的高浓度盐可能会沉淀在接触表面上,导致不锈钢组件生锈。

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图 1. 不同液相色谱系统经各种流动相冲洗后的金属释放量。

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图 2. 在生育酚的分析中,相比单独使用不锈钢材料的毛细管,安捷伦生物惰性 PEEK/不锈钢毛细管能够使保留时间(左图)和峰面积(右图)结果改善近 10 倍。

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表 3. 可靠的生物惰性 UHP-FF 接头(左图)在拧紧接头的过程中不会使毛细管产生任何扭转运动。 “手紧”扳手(右图)使接头更易拧紧。

承受高操作压力的能力

遗憾的是,不含金属材料的 PEEK 毛细管仅可承受最高 300 bar 的压力。即使如此,毛细管的灵活性仍会受到影响。为满足研究人员对生物惰性、稳定性和更高操作压力不断增长的需求,安捷伦设计出生物惰性毛细管,其在 PEEK 衬管的外层包覆了高强度的不锈钢,最高耐压可达 600 bar。安捷伦毛细管接头也使用了同样的技术,从而为生物惰性应用提供了高强度、不含金属的毛细管/接头流路。

无金属解决方案可避免腐蚀

内部采用 PEEK 材料制造的安捷伦生物惰性毛细管色谱柱适用于 1 至 14 的整个 pH 范围。不锈钢包覆层可支持最高 600 bar 的压力,远远超出单独 PEEK 材料所承受的 300 bar 压力限值范围。

安捷伦独家提供不含金属的样品流路 UHPLC 系统,可用于 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱。其他系统使用金属合金,而这些金属合金可能导致蛋白质络合物的形成,以及更高程度的腐蚀 [1]。图 1 显示了安捷伦生物惰性毛细管具有限制金属从液相色谱系统中释放的卓越特性。

另一项应用挑战是维生素 E 或生育酚,它们在铁存在的条件下会发生降解。传统分析中使用的不锈钢液相色谱系统会导致峰拖尾甚至出现样品损失。利用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱及其生物惰性毛细管,生育酚不会发生降解,最终的保留时间和峰面积精度结果改善了 10 倍 [2]。图 2 显示了详细信息。

易于安装,不会产生应力

毛细管的机械联锁式 PEEK 尖端对横向或旋转张力具有高耐受性,可避免拧紧接头的过程中毛细管发生扭转。用于抓取接头顶部的滑套扳手使接头更易于用手拧紧(图 3)。

适于所有应用的接头

安捷伦 PEEK/不锈钢毛细管是 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统的主“命脉”。安捷伦提供了适于所有应用的各种毛细管,能够高效地从原始样品获取分析结果。安捷伦毛细管选择指南非常全面,提供选择适合实际应用的最佳毛细管的完善建议。

安捷伦的 BioHPLC 色谱柱与 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统的组合是一套非常出色的解决方案,能够改善分析性能、灵敏度、可靠性以及生产效率。 它是聚集体分析、电荷异构体分析、脱酰氨基化和肽图分析的理想选择。 该解决方案提供了稳定可靠的仪器以及出众的色谱柱性能,能够更加快速地获取可靠的分析结果。

有关安捷伦生物惰性系统相关优势的全面概况,请参阅《生物惰性液相色谱系统产品样本》

参考文献

  1. S. Schneider. “性能验证:使用 ICP-MS 测定 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统释放出的低含量金属”应用简报,安捷伦科技公司,出版号 5990-9352CHCN (2011).
  2. S. Schneider. “初榨橄榄油的质量分析 – 第 4 部分”,应用简报,安捷伦科技公司,出版号 5991-2180CHCN (2013).

图 1.

不同液相色谱系统经各种流动相冲洗后的金属释放量。

图 2.

在生育酚的分析中,相比单独使用不锈钢材料的毛细管,安捷伦生物惰性 PEEK/不锈钢毛细管能够使保留时间(左图)和峰面积(右图)结果改善近 10 倍。

图 3.

可靠的生物惰性 UHP-FF 接头(左图)在拧紧接头的过程中不会使毛细管产生任何扭转运动。 “手紧”扳手(右图)使接头更易拧紧。