Seahorse XF 이미징 및 Normalization 시스템

그 어느 때보다 성공적인 XF 분석을 수행합니다

Agilent Technologies는 견고한 Seahors XF 대사 분석 플랫폼과 BioTek Cytation 시스템의 다용도 이미징 기능을 결합한 통합 이미징 및 normalization 시스템을 제공합니다.

이 동영상을 통해 어떻게 이 솔루션이 XF 데이터 해석을 향상시키는지 확인하세요.

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데이터 해석의 개선

XF 데이터를 normalization하여 세포 계수 또는 샘플간 편차를 설명하면 well, 플레이트 및 실험에서 데이터를 보다 쉽게 비교할 수 있으므로 신뢰성있고 유의미한 결론을 도출할 수 있습니다.

Normalization 전, 대사 표현형은 표현도 전체에 흩어져 있습니다. normalization 후, 대사 표현형은 공통적인 기초 수준 및 유사한 대사 표현형 주변에 클러스터링됩니다. 세포는 well당 1×10⁴, 1.5×10⁴, 2×10⁴, 2.5×10⁴, 3×10⁴의 세포 수로 시딩했습니다. XF 에너지 표현형 테스트는 oligomycin + FCCP(각각 1.0μM 및 0.5μM 최종)를 주입하고 20μM Hoechst 33342(2.0μM 최종)를 포함하여 수행되었습니다.

Cell Count Normalization을 Wave 소프트웨어에 통합하는 턴키 솔루션

Agilent Seahors XF 이미징 및 Cell Counting 소프트웨어는 정확한 cell counting을 위해 이미지 수집을 자동화하고 단순화합니다. BioTek 및 Seahorse 기기를 모두 제어하는 통합 컨트롤러는 명시야(XF 분석 전후) 및 형광(XF 분석 후) 이미지를 수집하여 세포 count를 계산합니다. 그런 다음 이미지와 count 수를 Wave 소프트웨어로 원활하게 전송합니다.

XF 데이터 무결성 및 문서화를 개선하는 강력한 소프트웨어 도구

Wave에 내장된 명시야 이미지는 라이브셀 분석 재현성과 XF 데이터 품질을 향상시키기 위해 세포 시딩 조건의 시각적 피드백과 품질 제어를 제공합니다. Wave의 알림이 세포 계수 및 이미지의 가용성을 표시합니다. 세포 계수의 히트 맵 표시를 통해 세포 시딩 일관성을 쉽게 평가할 수 있습니다.

XF 데이터에 대한 신뢰도를 향상시키는
새로운 Wave 도구

새로운 이미지 well 뷰
Normalization 모드 알림
세포 계수의 히트 맵 표시
이미지 비교
플래그 이미지

워크플로를 최적화하는 새로운 XF 이미징 및 세포 계수 소프트웨어

검증된 단일 수집 프로토콜
명시야 수집, 시각화 및 내보내기
이미지 플래깅 및 내보내기
형광 수집, 시각화 및 내보내기

세포 증식 속도는 XF 데이터 해석에 영향을 미칩니다

이 그림은 이미징 및 normalization 시스템을 사용하여 in situ 핵 염색 및 in situ 세포 계수를 통해 수행되는 XF 데이터 normalization의 예를 보여줍니다. 각 well의 다양한 세포 수가 XF 데이터에 미치는 영향이 해결되었습니다.

SKOV3 세포는 well 당 1×10⁴, 2×10⁴, 3×10⁴ 세포 수로 플레이팅 하였고 24시간 배양한 후 XF 세포 에너지 표현형 테스트를 수행한 후 이미지 분석을 수행했습니다. A) 20μM Hoechst 33342(2μM 최종)를 포함하여 oligomycin + FCCP(각각 1.0μM 및 0.5μM 최종) 주입(화살표)에 따라 원시 OCR 및 ECAR이 변경됩니다. B) Hoechst 33342(상단 패널)로 형광 라벨링된 핵과 Cytation 1(하단 패널)이 포함된 Seahorse XF 이미징 및 세포 계수 소프트웨어를 사용하여 식별하여 나타낸 핵의 대표적인 이미지. C) 세포 계수(평균 ± SD, n=4)를 in situ 핵 염색하여 normalization한 OCR 및 ECAR.

이미징 및 Normalization 시스템 구성 요소

완전 통합된 시스템은 다음과 같은 구성 요소가 필요합니다.