원하는 방식으로 분리 및 정제: siRNA에서 mRNA로
애질런트는 올리고뉴클레오타이드 환경의 다양성에 대한 인식을 바탕으로 강력한 분리능, 재현성 및 긴 컬럼 수명을 위한 최적의 케미스트리를 제공합니다.
Agilent AdvanceBio 올리고뉴클레오타이드 컬럼은 고효율의 2.7μm 및 4μm 표면 다공성 Poroshell 입자를 특징으로 합니다. 애질런트의 독점적인 기술을 사용하여 입자를 화학적으로 변형함으로써 높은 pH 이동상에 대한 저항성을 크게 높였습니다. 이는 최적의 분리능과 올리고뉴클레오타이드 분리를 위한 더 우수한 분리 및 변성 조건을 제공합니다. 또한 올리고뉴클레오타이드에 대한 우수한 선택성을 제공하는 엔드캡핑된 C18 상(Phase)과 결합하여 LC/UV 및 LC/MS 특성화 워크플로에 이상적으로 만들었습니다. 그뿐 아니라, 일관된 성능을 보장하기 위해 분리능 표준을 사용하여 AdvanceBio 올리고뉴클레오타이드 배지의 모든 배치를 테스트합니다.
작은 올리고뉴클레오타이드 특성 규명
mRNA 특성 규명
애질런트는 올리고뉴클레오타이드의 이온쌍 역상(IP-RP) 분석을 지원하기 위해 두 가지 입자 케미스트리를 제공합니다.
AdvanceBio 올리고뉴클레오타이드 컬럼 제품군은 100Å 공극 크기와 2.7μm 및 4μm 입자 크기로 제공되는 고효율 및 고분해능 표면 다공성 입자 케미스트리를 제공합니다. 분석 스케일부터 10mm 내경 semi-prep 및 21.2mm 내경 분취 스케일에 이르기까지 다양한 차원을 제공하는 완전히 확장 가능한 컬럼 케미스트리 플랫폼입니다. 짧은 합성 올리고의 고분해능 분리를 위해서는 AdvanceBio 올리고뉴클레오타이드 컬럼 케미스트리가 이상적인 선택입니다.
Agilent PLRP-S 고분자 배지는 물리적, 화학적으로 견고하므로 IP-RP 올리고뉴클레오타이드 정제에 필요한 까다로운 이동상 조건에 매우 적합합니다. 다양한 입자(3μm-30μm)와 공극 크기(100Å부터 최대 4000Å까지)에 걸쳐 제공되는 PLRP-S는 분석 스케일부터 100mm 내경 분취 스케일까지 다양하게 제공되어 mRNA와 같은 긴 올리고 시퀀스 또는 더 큰 공정 스케일의 분취 정제에 이상적입니다.
이 두 가지 애질런트 컬럼 포트폴리오는 초기 발견 단계부터 공정 스케일 정제에 이르기까지 모든 올리고뉴클레오타이드 IP-RP 분리 워크플로 요구를 항상 지원할 수 있습니다.
지난 수십 년 동안, RNA, 그리고 DNA 수준에서까지 단백질 발현 조절을 위한 새로운 치료 방식에 대해 관심이 계속 집중되어 왔습니다. 올리고뉴클레오타이드(ON)의 정제는 API와 불순물의 높은 유사성으로 인해 특히 어려울 수 있습니다.
애질런트는 각 올리고뉴클레오타이드 API의 고유한 난제에 대한 인식을 바탕으로 고객의 요구를 충족시킬 수 있는 다양한 케미스트리, 공극 크기와 규격을 제공합니다.
1000Å 및 4000Å 공극 전체 다공성 입자를 사용하는 Agilent PL-SAX 컬럼은 치료용 올리고뉴클레오타이드 정제에 사용하기에 특히 적합합니다. 이를 위해 gRNA 분리를 위한 유기 변형제를 포함한 Tris-HCl과 같은 일반적인 완충액을 사용하거나 티올화 올리고뉴클레오타이드의 산화 불순물을 분리하기 위한 강한 염기성 조건을 사용합니다.
기존의 실리카 및 작은 공극 케미스트리와 달리 PL-SAX는 다양한 올리고뉴클레오타이드 크기 및 변형을 분리하는 데 필요한 최적의 공극 크기와 함께 뛰어난 pH 및 온도 안정성을 제공합니다.
Agilent AdvanceBio 스핀 컬럼 및 플레이트를 사용하면 시료 매트릭스에서 과도한 염분이나 합성 부산물과 같은 원치 않는 작은 분자를 쉽고 빠르게 제거하거나 다양한 완충액 조건 간에 시료 매트릭스를 교환할 수 있습니다.
이러한 겔 여과 기반 스핀 컬럼은 단일 시료를 위한 분석 및 준분취 스케일 컬럼과 높은 처리량을 위한 96-시료 플레이트로 제공됩니다. 컬럼 베드에는 세 가지 형식 모두에서 동일한 가교 덱스트란 입자가 포함되어 있으므로 사용자는 시료 수나 용량을 쉽게 확장하거나 축소할 수 있습니다.
자세히 알아보기애질런트는 올리고뉴클레오타이드 분석에 최적화된 기기, 소프트웨어, 컬럼 및 소모품을 포함하는 완전한 워크플로를 제공합니다. 또한 애질런트는 후기 단계 및 상업 용량 올리고뉴클레오타이드의 GMP 제조에 도움을 드릴 수 있습니다.
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애질런트는 PLRP-S 고분자 폴리머 충전제와 함께 다양한 입자와 공극 크기를 제공합니다. 벤치에서 공정까지, PLRP-S는 고객의 요구에 따라 확장 가능합니다.
이 응용 자료에서는 Bio SAX와 PL-SAX를 비교합니다. Bio SAX는 고분해능 정제에 최적인 반면, PL-SAX는 높은 결합 용량에 이상적입니다.
합성 올리고뉴클레오타이드는 크기, 구조 및 변형이 매우 다양한 분자로 진화했습니다. 이러한 다양성을 통해 부모 분자와 높은 상동성을 갖는 많은 합성 관련 불순물이 등장했습니다.
이 일련의 무료 교육 모듈은 올리고뉴클레오타이드 정제 이론에 대해 토론하며, 빠른 동영상 모듈에서 케미스트리 선택, 분석법 최적화, 스케일 업 및 API 특성 규명에 걸쳐 안내합니다.
모듈 1은 수율, 분리능 및 처리량을 포함한 정제 분석법을 최적화할 때 고려해야 할 일련의 변수에 대해 설명합니다.
합성 올리고뉴클레오타이드는 크기가 몇 개의 염기에서 1000개의 염기까지 길이가 다양할 수 있습니다 . 올리고뉴클레오타이드는 절단, 불완전한 티올화, 염기 손실 및 부가 이온을 포함하여 이 합성과 관련된 많은 불순물을 가질 수 있습니다. 우리는 순수한 API를 위해 정제가 필요한 여러 불순물을 탐구합니다.
치료제로 사용되는 올리고뉴클레오타이드 크기의 범위와 함께 효과적인 질량 전달을 위한 충분한 크기의 공극을 가지면서 최대 결합 용량을 제공할 수 있는 최적의 공극 크기를 선택하는 것이 중요합니다. 이 모듈에서는 올리고뉴클레오타이드 정제 및 향후 스케일 업을 위한 최적의 공극 크기를 결정하기 위한 동적 결합 용량 실험을 살펴봅니다.
음이온 교환(AEX)은 제조 단계까지 쉽게 스케일 업할 수 있는 저비용 완충액 시스템 때문에 정제 분석법으로 선택되는 경우가 많습니다. 이 모듈에서는 온도, 유기용매 및 pH와 같은 일반적인 변수를 조정하여 분리를 개선하기 위한 AEX의 최적화에 대해 설명합니다.
이온쌍 역상 분리는 올리고뉴클레오타이드 특성 규명 및 정제에 종종 사용됩니다. 고분해능 분리를 제공하는 이온쌍 역상은 종종 까다롭고 동시 용리되는 불순물을 분리하는 데 사용됩니다. 이 모듈에서는 온도, 공극 크기, 이온쌍 선택 및 향후 스케일 업을 포함한 분석법 최적화에 대해 설명합니다.
올리고뉴클레오타이드 합성, 정제 및 최종 제형 과정에서 최종 순도에 대한 API 모니터링은 중요한 처리량 처리입니다. 이 모듈에서는 최적의 이온쌍 및 hexafluoroisopropanol(HFIP) 농도를 선택하는 것을 포함하여 올리고뉴클레오타이드 특성 분석 규명을 위한 LC/MS 사용에 대해 살펴봅니다.