La nuova generazione di terapie con cellule immunitarie richiede una nuova generazione di strumenti di analisi.
Un prodotto di cellule immunitarie che sia sicuro, efficace e persistente dipende dalla capacità degli sviluppatori di gestire alla perfezione l’intero repertorio delle funzioni delle cellule immunitarie: attivazione, proliferazione, destinazione cellulare, eliminazione citotossica, immunomodulazione e memoria. Tutto ciò deve essere realizzato nel micro ambiente tumorale che oltre ad essere tossico e immunosoppressivo è anche soggetto a continui cambiamenti.
Agilent si impegna nel supporto di queste terapie di nuova generazione fornendo tecnologie fondamentali per consentire il gene-editing ad alta efficienza e la valutazione in tempo reale delle funzioni, del fenotipo e del destino cellulare Usato nel suo complesso, questo corredo di strumenti offre la capacità di misurare e controllare le funzioni delle cellule immunitarie. Ciò consente agli esperti di ricerca traslazionale e agli sviluppatori di ottenere il necessario livello di potenza terapeutica e sicurezza.
Breakthroughs in Immunotherapy
- A chat with Carl June
David Ferrick di Agilent intervista Carl June, rinomato immunologo e pioniere dell’immunoterapia.
Misurare fenotipo, potenza e persistenza in tutte le fasi dello sviluppo
Scoperta
Il corredo di strumenti per l’immunoterapia Agilent consente di effettuare i cicli iterativi di cui i ricercatori hanno bisogno nelle prime fasi di scoperta. Editing CRISPR stabile on-target, combinato con l’immunofenotipizzazione (NovoCyte/Quanteon) e con la capacità di valutare e convalidare le modifiche su piattaforme per cellule vive che forniscono dati funzionali rilevanti con risoluzione temporale (xCELLigence/Seahorse XF).
Traslazione
Testa le modifiche dei geni e altre strategie interventive per la fenotipizzazione, l’ efficienza di eliminazione, la persistenza, gli effetti on-target/off-target e la programmazione del destino cellulare. Quindi metti in relazione questi dati con effetti inibitori come esaurimento, anergia e altri fenotipi di fuga a causa delle interazioni con un tumore in costante evoluzione e con il suo micro ambiente. Le analisi Agilent xCELLigence e Seahorse XF sono in grado di misurare in modo sensibile le funzioni di cellule vive e contemporaneamente di effettuare una scansione dei componenti temporali di una risposta immunitaria in continua evoluzione in termini di efficacia, persistenza e sicurezza.
Produzione
Le piattaforme Agilent Seahorse XF e xCELLigence vengono valutate da differenti gruppi di sviluppo e produzione per definire i criteri fondamentali di qualità e di prestazioni del processo che influiscono sulla potenza e sull’efficacia. Quando i processi passano dalla fase di sviluppo a quella di produzione, passa con facilità agli RNA guida SureGuide prodotti nel rispetto delle linee guida GMP utilizzando la stessa tecnologia di sintesi.
Scopri il corredo di strumenti Agilent per la terapia con cellule immuni
Real Time Cell Analysis (RTCA) xCELLigence
Quantifica il comportamento dinamico delle cellule che potrebbe non essere rilevato da metodi endpoint intensivi per ottenere una misurazione più completa dell’uccisione delle cellule cancerogene, inclusi i possibili fenotipi di fuga.
La tecnologia RTCA xCELLigence offre un flusso di lavoro semplice, robusto e senza marcatura che consente la misurazione di diverse cellule e molecole effettrici per stabilirne la citotossicità. Si tratta di una piattaforma per una più sensibile valutazione in vitro della potenza che aiuta a riprodurre le attività in vivo.
La citolisi percentuale di cellule cancerogene target PC3 (Prostata) da parte di cellule effettrici NK92 è misurata sul sistema xCELLigence a partire da rapporti effettore/target di 0,625:1.
Webinar
The Next Generation of CAR-T Cells (La nuova generazione di cellule CAR T)
Mark C. Johnson, Ph.D. Team Leader, Cell Therapy Discovery
Cynthia Bamdad, Ph.D. Chief Executive Officer Minerva
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Articolo
Quantifying Immune Cell–Mediated Killing
Kristin Anderson, Ph.D., Vita Golubovskaya Ph.D.
Cynthia Bamdad, Ph.D., Dan MacLeod, Ph.D., Michael Overstreet Ph.D.
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Manuale di immunoterapia
Scopri analisi di potenza funzionale per la ricerca nel campo dell’immunoterapia tumorale
Nuovi metodi quantitativi per monitorare il comportamento delle cellule immunitarie in vitro.
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Analisi Agilent Seahorse XF
Scopri e regola la programmazione delle cellule immunitarie per creare una risposta antitumorale continuativa e vigorosa. L’analisi metabolica in tempo reale ti permette di misurare e regolare gli elementi che determinano il destino e le funzioni delle cellule. Quantifica la cinetica di attivazione e determina il fenotipo metabolico e l’adeguatezza ottimali per definire la potenza del prodotto.
Sia la glicolisi che la fosforilazione ossidativa mitocondriale definiscono l’attivazione delle cellule T e le funzioni degli effettori. La glicolisi determina un fenotipo effettore robusto e di breve durata. Al contrario la fosforilazione ossidativa e il metabolismo degli acidi grassi regolano la persistenza e la generazione continuativa delle cellule T della memoria .
Apri una finestra per rilevare precocemente le risposte di attivazione delle cellule T a pochi minuti dalla stimolazione misurando il tasso di acidificazione extracellulare (ECAR) glicolitico in tempo reale.
Maggiori informazioni
Webinar
Exploring the metabolism of CAR-T cells (Esplorare il metabolismo delle cellue CAR-T)
Roddy O’Connor, PhD
University of Pennsylvania Center for Cellular Immunotherapies
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Webinar
T cell metabolism in activation and exhaustion (Metabolismo delle cellule T nell’attivazione e nell’esaurimento)
Greg M. Delgoffe, Ph.D. Assistant Professor
Tumor Microenvironment Center University of Pittsburgh
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Webinar
Rapid adoption of live cell kinetics and real time biology in the design and validation of adoptive T cell strategies (Adozione rapida di cinetica di cellule vive e biologia in tempo reale nella progettazione e validazione di strategie con cellule T adottive)
David Ferrick, Ph.D., Senior Director, Agilent Technologies, Inc.
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Citometri a flusso NovoCyte e Quanteon
Citometri a flusso da banco ad alte prestazioni progettati per utilizzatori di qualsiasi livello. Per un’immunofenotipizzazione rapida e accurata con un massimo di 25 canali di fluorescenza utilizzando la tecnologia per rivelatori con fotomoltiplicatore al silicio più sensibile disponibile sul mercato. Prova il nuovo strumento di riferimento per la citofluorimetria a flusso.
Effettua il monitoraggio dell’espansione delle cellule T, della tossicità dei composti, degli effetti dei farmaci sulla crescita delle cellule tumorali, del comportamento delle cellule immunitarie in differenti condizioni e di molto altro ancora.
Il software NovoCyte è dotato di un modulo integrato per la modellizzazione della proliferazione delle cellule, mostrato nel diagramma riportato qui accanto. Esso identifica ogni generazione della divisione cellulare e quindi calcola l’indice di proliferazione.
NovoCyte Quanteon è il citometro a flusso da banco più avanzato attualmente disponibile sul mercato. Con quattro laser e fino a 25 fotomoltiplicatori indipendenti, è ideale per la ricerca nell’ambito della immuno-oncologia in grado di supportare i pannelli di indagine più esigenti. Aggiungi il sistema NovoSampler Q per l’automazione del processo.
A destra è mostrato un pannello di immunofenotipizzazione pan-leucocitaria a 18 colori su cellule PBMC mediante NovoCyte Quanteon. Questo pannello è stato progettato per monitorare differenti sottoinsiemi immunitari con marker di attivazione e differenziazione.
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Video di consigli per il banco
Simplifying Cell Proliferation Studies with Flow Cytometry (Semplifica gli studi di proliferazione delle cellule con la citofluorimetria a flusso)
Rendi più facile la tua analisi con una soluzione software integrata
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Webinar
A Flow Cytometry Method for Detecting Bacteria in Water (Un metodo basato sulla citofluorimetria a flusso per rilevare i batteri nell’acqua)
Stephanie Ting, M. Eng
Field Application Scientist
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Webinar
Characterizing Potential Biomarkers using xCELLigence and NovoCyte (Caratterizzazione di potenziali biomarcatori mediante xCELLigence e NovoCyte)
Steve Offer, Assistance Professor of Pharmacology
Mayo School of Medicine
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sgRNA sintetizzati chimicamente Agilent SureGuide
Gli RNA guida sintetizzati chimicamente Agilent offrono il pieno potenziale della tecnica CRISPR per l’ingegneria e l’immunoterapia cellulare.
Questi RNA a guida singola sintetizzati chimicamente, lunghi e di alta qualità, sono ideali per l’ingegneria cellulare basata sulla tecnica CRISPR. Con opzioni di personalizzazione, come modifiche per aumentarne la stabilità e la specificità, per offrirti risultati uniformi e lo sviluppo di prodotti terapeutici innovativi e affidabili. La fabbricazione su piccola scala a livello di ricerca e la capacità di produzione su grande scala secondo le linee guida GMP danno come risultato una soluzione completa per le tue esigenze di ingegneria cellulare, dalla ricerca ai test clinici, offrendoti livelli di qualità e affidabilità su cui puoi contare.
Le proprietà chimiche proprietarie consentono di sintetizzare sgRNA lunghi e di elevata purezza. Questo processo offre la fabbricazione scalabile di sgRNA di elevata purezza, fornendo opzioni esclusive per la progettazione degli sgRNA e la configurazione precisa della funzionalità molecolare per aumentare le prestazioni della tecnica CRISPR-Cas.
Le opzioni di personalizzazione includono la capacità di aggiungere modifiche per aumentare la stabilità e la specificità per ottenere risultati più uniformi. Per esempio, aggiungendo un’unica modifica nella posizione 5 o 11 nella sequenza di RNA guida del cluster beta dell’emoglobina (HBB) si riduce drasticamente il livello di attività off-target mentre si mantiene un elevato livello di attività nel sito target.
Webinar
Improving CRISPR Performance Through Guide RNA Enhancements (Migliorare le prestazioni di CRISPR migliorando l’RNA guida)
Mark Dewitt, Project Manager, Corn Lab UC Berkley
Dan Ryan, Advanced Research Scientist, Agilent Labs
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Articolo
Improving CRISPR–Cas specificity
with chemical modifications in single-guide RNAs
Ryan, Daniel E et al, Nucleic Acids Res., 2018 Jan 25; 46(2): 792-803
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Articolo
Novel Modifications and High Purity Guides
Enhance CRISPR Performance
Laurakay Bruhn, Biological Chemistry, Agilent Research Laboratories
Genetic Engineering & Biotechnology News, 577153: 22
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Accelera lo sviluppo delle tue terapie con cellule immunitarie
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Solo per scopi di ricerca. Non utilizzabile per procedure diagnostiche.
