La nouvelle génération d’immunothérapie cellulaire nécessite une nouvelle génération d’outils d’analyse des cellules
Un produit à base de cellules immunitaires sûr, puissant et persistant dépend de la capacité de ses concepteurs à assembler l’ensemble des fonctions des cellules immunitaires : l’activation, la prolifération, le devenir cellulaire, la destruction cytotoxique, la modulation immunitaire et la mémoire. Tout ceci doit être réalisé dans le microenvironnement tumoral suppressif, toxique et en constante évolution.
Agilent se consacre au soutien de ces thérapies de nouvelle génération, en fournissant des technologies essentielles permettant l’édition génique très efficace et l’évaluation du fonctionnement, du phénotype et du devenir des cellules en temps réel. Utilisé conjointement, ce banc d’outils permet de mesurer et de contrôler le fonctionnement des cellules immunitaires. Ceci permet aux acteurs de la recherche translationnelle et du développement d’obtenir le niveau de sécurité et de puissance thérapeutique nécessaires.
Avancées en immunothérapie
- Conversation avec Carl June
David Ferrick d’Agilent s’entretient avec Carl June, immunologiste renommé et pionnier de l’immunothérapie.
Évaluation du phénotype, de la puissance et de la persistance à toutes les phases du développement
Recherche
Le banc d’outils pour l’immunothérapie Agilent couvre les cycles itératifs dont les chercheurs ont besoin en phase de recherche. Il permet l’édition ciblée et stable de CRISPR combinée à l’immunophénotypage (NovoCyte/Quanteon), ainsi que l’évaluation et la validation des modifications sur des plateformes avec cellules vivantes qui fournissent les données fonctionnelles avec résolution temporelle recherchées (xCELLigence/Seahorse XF).
Transfert
Testez les effets d’éditions géniques et d’autres stratégies interventionnelles sur le phénotypage, l’efficacité de destruction, la persistance, les effets sur/en dehors de la cible et la programmation du devenir cellulaire. Puis corrélez ces données aux effets inhibiteurs tels que l’épuisement, l’anergie, et d’autres phénotypes d’échappement dus aux interactions avec une tumeur en constante évolution et son micro-environnement. L’analyse Seahorse XF et xCELLigence Agilent peut mesurer de manière sensible la fonction des cellules vivantes et balayer simultanément les composantes temporelles et la réponse immunitaire en termes d’efficacité, de persistance et de sécurité.
Production
Les plateformes Agilent Seahorse XF et xCELLigence sont en cours d’évaluation par divers groupes de développement et de production afin de définir les principaux critères de qualité et de performance des processus influant sur l’efficacité et la puissance. Lors du passage du développement à la production, opérez une transition transparente vers les ARN messagers SureGuide produits selon les bonnes pratiques de fabrication à l’aide d’une technologie de synthèse identique.
Découvrez le banc d’outils d’immunothérapie cellulaire Agilent
Analyse de cellules en temps réel (RTCA) xCELLigence
Quantifiez le comportement dynamique des cellules qui peut avoir échappé aux méthodes expérimentales nécessitant beaucoup de main d'œuvre pour obtenir une mesure plus complète de la destruction des cellules cancéreuses, y compris les éventuels phénotypes d’échappement.
La technologie RTCA xCELLigence offre un flux de tâches simple et robuste sans marquage, qui permet la mesure de la cytotoxicité de diverses cellules effectrices et molécules.
Cette plateforme évalue de manière plus sensible la puissance in vitro et facilite l’imitation ses actions in vivo.
Le pourcentage de cytolyse de cellules cancéreuses cibles PC3 (prostate) par les cellules effectrices NK92 est mesuré sur le système xCELLigence, avec un rapport effecteur/cible démarrant à 0,625/1.
Webinaire
The Next Generation of CAR-T Cells (La nouvelle génération de cellules CART-T)
Mark C. Johnson, Ph.D. Chef d’équipe, Recherche en thérapie cellulaire
Cynthia Bamdad, Ph.D. Directrice générale de Minerva
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Article
Quantifying Immune Cell–Mediated Killing
Kristin Anderson, Ph.D., Vita Golubovskaya, Ph.D.,
Cynthia Bamdad, Ph.D., Dan MacLeod, Ph.D., Michael Overstreet, Ph.D.
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Manuel d’immunothérapie
Explorez les tests de potentiel fonctionnel pour la recherche sur l'immunothérapie du cancer
Nouvelles méthodes quantitatives pour surveiller le comportement des cellules immunitaires in vitro.
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Agilent Seahorse XF Analyseur
Explorez et modulez la programmation des cellules immunitaires afin de lancer une réponse antitumorale robuste et durable. L’analyse métabolique en temps réel vous permet de mesurer et d’ajuster les facteurs influant sur le devenir des cellules immunitaires et sur leur fonction. Quantifiiez la cinétique d’activation et déterminez le phénotype métabolique optimal pour modeler la puissance du produit.
La glycolyse et la phosphorylation oxydative mitochondriale façonnent l’activation des lymphocytes T et la fonction effectrice. La glycolyse commande un phénotype effecteur robuste de courte durée. En revanche, l’OXPHOS et le métabolisme des acides gras ajustent la persistance et la formation des lymphocytes T mémoires.
Ouvrez rapidement une fenêtre pour détecter les réponses de l’activation des lymphocytes T quelques minutes seulement après la stimulation, en mesurant le taux d’acidification extracellulaire (ECAR) glycolytique en temps réel.
En savoir plus
Webinaire
Exploring the metabolism of CAR-T cells (Exploration du métabolisme des cellules CART-T)
Roddy O’Connor, PhD
Centre d’ Immunotherapies cellulaires de l’Université de Pennsylvanie
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Webinaire
T cell metabolism in activation and exhaustion (Métabolisme des lymphocytes T lors de l’activation et de l’épuisement)
Greg M. Delgoffe, Ph.D. Professeur adjoint
Tumor Microenvironment Centre de l’Université de Pittsburgh
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Webinaire
Rapid adoption of live cell kinetics and real time biology in the design and validation of adoptive T cell strategies (Adoption rapide de la cinétique des cellules vivantes et la biologie en temps réel durant l’élaboration et la validation des stratégies adoptives impliquant les lymphocytes T)
David Ferrick, Ph.D., Directeur principal, Agilent Technologies, Inc.
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Cytomètres de flux NovoCyte et Quanteon
Cytomètres de flux de paillasse à haute performance, conçus pour des utilisateurs de tous niveaux. Pour un immunophénotypage rapide et précis, avec jusqu’à 25 canaux de fluorescence utilisant la technologie de détecteur du type photomultiplicateur en silicium la plus sensible du marché. Testez la nouvelle référence en matière de cytométrie en flux.
Surveillez l’expansion des lymphocytes T, la toxicité des composés, les effets des médicaments sur la croissance des cellules tumorales, le comportement des cellules immunitaires dans différentes conditions, et plus encore.
Le logiciel NovoCyte présente un module intégré pour la modélisation de la prolifération cellulaire, qui est illustré dans le schéma ci-contre. Il identifie chaque génération de division cellulaire, puis calcule l’indice de prolifération.
Le système NovoCyte Quanteon est le cytomètre de flux de paillasse le plus évolué actuellement sur le marché. Avec quatre lasers et jusqu’à 25 photomultiplicateurs indépendants, il répond aux panels les plus exigeants, ce qui en fait un outil idéal pour la recherche immuno-oncologique. Ajoutez le NovoSampler Q pour une automatisation totale.
La représentation de droite illustre un panel d’immunophénotypage pan-leucocyte sur des PBMC en 18 couleurs, avec utilisation du NovoCyte Quanteon. Ce panel a été conçu pour surveiller différents sous-groupes immunitaires avec des marqueurs d’activation et de différenciation.
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Conseils sur le banc d’outils en vidéo
Simplifying Cell Proliferation Studies with Flow Cytometry (Simplification des études sur la prolifération des cellules avec la cytométrie en flux)
Facilitez vos analyses grâce à une solution logicielle intégrée
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Webinaire
A Flow Cytometry Method for Detecting Bacteria in Wate (Méthode de cytométrie en flux pour la détection des bactéries dans l’eau)
Stephanie Ting, M. Eng
Scientifique spécialiste des applications de terrain
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Webinaire
Characterizing Potential Biomarkers using xCELLigence and NovoCyte (Caractérisation des biomarqueurs potentiels avec xCELLigence et NovoCyte)
Steve Offer, Professeur adjoint de pharmacologie
Mayo School of Medicine
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Agilent SureGuide chemically synthesized sgRNAs
Les ARN messagers synthétisés par voie chimique d’Agilent aident à atteindre le plein potentiel des CRISPR en matière de génie cellulaire et d’immunothérapie.
Ces longs ARN messagers de grande qualité produits par voie chimique sont idéaux pour l’ingénierie cellulaire impliquant les CRISPR. Ils sont disponibles avec différentes options de personnalisation, telles que des modifications pour augmenter la stabilité et la spécificité, pour des résultats homogènes et le développement de nouveaux produits thérapeutiques robustes. Les capacités de fabrication à petite échelle destinée à la recherche et les capacités de fabrication à grande échelle conformément aux bonnes pratiques de fabrication offrent une solution intégrale pour vos besoins en génie cellulaire, de la recherche jusqu’aux essais cliniques, en vous procurant une qualité et une fiabilité dans lesquelles vous pouvez avoir confiance.
Des greffages exclusifs permettent la synthèse de longs ARNsg de grande pureté. Ce processus facilite la synthèse évolutive d’ARNsg de grande pureté, propose des options uniques durant la conception des ARNsg et permet l’installation précise de fonctionnalités moléculaires afin d’augmenter la performance des CRISPR-Cas.
Les options de personnalisation comprennent la possibilité d’ajouter des modifications pour accroître la stabilité et la spécificité, pour des résultats plus homogènes. Par exemple, l’ajout d’une seule modification en position 5 ou 11 de la séquence d’ARN messager de la
sous-unité d’hémoglobine bêta (HBB) réduit considérablement le niveau de l’activité hors cible, tout en maintenant un haut niveau d’activité sur le site ciblé.
Webinaire
Improving CRISPR Performance Through Guide RNA Enhancements (Amélioration de la performance des CRISPR grâce aux améliorations des ARN messagers)
Mark Dewitt, chef de projet, Corn Lab UC Berkley
Dan Ryan, scientifique en recherche avancée, Agilent Labs
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Article
Improving CRISPR–Cas specificity
with chemical modifications in single-guide RNAs
Ryan, Daniel E. et al, Nucleic Acids Res., 2018 Jan 25; 46(2): 792-803
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Article
Novel Modifications and High Purity Guides
Enhance CRISPR Performance
Laurakay Bruhn, Biological Chemistry, Agilent Research Laboratories
Genetic Engineering & Biotechnology News, 577153: 22
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Accélérer votre développement d’immunothérapie cellulaire
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Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser à des fins diagnostiques.
