La nueva generación de terapias con células inmunitarias requiere una nueva generación de herramientas de análisis
Para que un producto con células inmunitarias sea seguro, potente y persistente, los desarrolladores deben disponer de información sobre todos los aspectos de la función de dichas células: activación, proliferación, destino celular, citotoxicidad, inmunomodulación y memoria. Y todo ello teniendo en cuenta el microentorno del tumor, que es supresor y tóxico y está en constante cambio.
Agilent dedica sus esfuerzos a prestar soporte a estas terapias de nueva generación, aportando tecnologías esenciales que permiten llevar a cabo la edición genética y la evaluación de la función, el fenotipo y el destino de las células en tiempo real y con una elevada eficiencia. El uso conjunto de este banco de herramientas ofrece la capacidad de medir y controlar la función de las células inmunitarias. Esto permite a los científicos que se dedican a la investigación traslacional y al desarrollo conseguir que los productos farmacéuticos ofrezcan los niveles necesarios de potencia y seguridad.
Avances en inmunoterapia:
entrevista a Carl June
David Ferrick, de Agilent, entrevista a Carl June, afamado inmunólogo y pionero en el campo de la inmunoterapia.
Medida del fenotipo, la potencia y la persistencia en todas las fases del desarrollo
Descubrimiento
El banco de herramientas de inmunoterapia de Agilent abarca los ciclos iterativos que los investigadores deben llevar a cabo en las primeras etapas del proceso de descubrimiento. La combinación de la edición CRISPR estable y específica, el inmunofenotipado (NovoCyte/Quanteon) y la capacidad de evaluar y validar ediciones genéticas en plataformas con células vivas proporciona datos de interés y resueltos en el tiempo sobre la función celular (xCELLigence/Seahorse XF).
Traducción
Pruebas de edición genética y otras estrategias intervencionistas para determinar el fenotipo, la eficiencia citotóxica, la persistencia, los efectos específicos y colaterales, y la programación del destino celular. Después, pueden establecerse relaciones entre estos datos y los efectos inhibitorios como el agotamiento, la anergia y otros fenotipos resistentes provocados por interacciones con el tumor, en constante evolución, y su microentorno. Los analizadores Agilent xCELLigence y Seahorse XF pueden medir con una alta sensibilidad la función celular en células vivas y efectuar simultáneamente un barrido de los componentes temporales de la respuesta inmunitaria, siempre en constante cambio, en términos de eficacia, persistencia y seguridad.
Producción
Diversos grupos de desarrollo y producción están evaluando las plataformas Agilent Seahorse XF y xCELLigence para definir criterios esenciales de calidad y rendimiento de los procesos que pueden afectar a la potencia y la eficacia. A la hora de pasar del desarrollo a la producción, garantice una transición perfecta con los ARN guía SureGuide, obtenidos mediante buenas prácticas de fabricación (GMP) y usando la misma tecnología de síntesis.
Descubra el banco de herramientas de Agilent para terapias con células inmunitarias
Sistema xCELLigence de análisis celular en tiempo real (RTCA)
Cuantifique el comportamiento dinámico de las células que los laboriosos métodos de punto final pueden pasar por alto y mida de forma más completa la citotoxicidad para las células cancerosas, incluidos los posibles fenotipos resistentes.
La tecnología xCELLigence RTCA ofrece un flujo de trabajo robusto, sencillo y sin marcadores que permite medir la citotoxicidad de diferentes células y moléculas efectoras. Es una plataforma que posibilita evaluar la potencia in vitro con mayor sensibilidad y ayuda a replicar la actividad in vivo.
Medida porcentual de la citólisis de las células cancerosas diana PC3 (de próstata) provocada por células efectoras NK92 mediante el uso del sistema xCELLigence, comenzando con una relación efector-diana muy baja (de hasta 0,625:1).
Seminario web
The Next Generation of CAR-T Cells (La nueva generación de linfocitos T con CAR)
Dr. Mark C. Johnson, jefe de equipo de descubrimiento de terapias celulares
Dra. Cynthia Bamdad, directora ejecutiva de Minerva
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Artículo
Quantifying Immune Cell–Mediated Killing
Dra. Kristin Anderson, Dra. Vita Golubovskaya,
Dra. Cynthia Bamdad, Dr. Dan MacLeod y Dr. Michael Overstreet
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Manual de inmunoterapia
Descubra los ensayos de potencia funcional para la investigación de inmunoterapias contra el cáncer
Nuevos métodos cuantitativos para monitorizar el comportamiento in vitro de las células inmunitarias.
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Analizadores Agilent Seahorse XF
Descubra y afine la programación de las células inmunitarias para conseguir una respuesta antitumoral más sostenida y robusta. El análisis metabólico en tiempo real permite medir y afinar los factores que controlan el destino y la función de las células inmunitarias. Cuantifique la cinética de activación y determine la aptitud y el fenotipo metabólico óptimos para definir la potencia del producto.
La glucólisis y la fosforilación oxidativa mitocondrial definen la activación y la función efectora de los linfocitos T. La glucólisis produce un fenotipo efector robusto y de corta duración. En cambio, la fosforilación oxidativa y el metabolismo de los ácidos grasos afinan la persistencia y la formación sostenida de los linfocitos T memoria.
Abre una ventana temprana de oportunidad para detectar las respuestas de activación de los linfocitos T pocos minutos después de la estimulación mediante la medida en tiempo real de la velocidad de acidificación extracelular glucolítica (ECAR).
Más información
Seminario web
Exploring the metabolism of CAR-T cells (Análisis del metabolismo de los linfocitos T con CAR)
Dr. Roddy O'Connor
Centro de Inmunoterapias Celulares de la Universidad de Pensilvania
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Seminario web
T cell metabolism in activation and exhaustion (Metabolismo de los linfocitos T durante la activación y el agotamiento)
Dr. Greg M. Delgoffe Profesor asociado
Centro de Microentornos Tumorales de la Universidad de Pittsburgh
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Seminario web
Rapid adoption of live cell kinetics and real time biology in the design and validation of adoptive T cell strategies (Adopción rápida de la cinética en células vivas y la biología en tiempo real para el diseño y la validación de estrategias de adopción de linfocitos T
Dr. David Ferrick, director sénior, Agilent Technologies, Inc.
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Citómetros de flujo NovoCyte Quanteon
Citómetros de flujo de sobremesa de alto rendimiento diseñados para todo tipo de usuarios. Consiga un inmunofenotipado rápido y preciso con hasta 25 canales de fluorescencia gracias a la tecnología de detector fotomultiplicador de silicio más sensible del mercado. Descubra la nueva referencia en la citometría de flujo.
Monitorice la expansión de los linfocitos T, la toxicidad de los compuestos, los efectos de los fármacos sobre el crecimiento de las células tumorales y el comportamiento de las células inmunitarias en diferentes condiciones, entre muchas otras cosas.
El software NovoCyte incorpora un módulo de modelado de la proliferación celular, que se muestra en el diagrama situado a la izquierda. Identifica cada generación de división celular y, seguidamente, calcula el índice de proliferación.
El citómetro de flujo de sobremesa NovoCyte Quanteon es el más avanzado que puede encontrarse hoy en día en el mercado. Con cuatro láseres y hasta 25 fotomultiplicadores independientes, es idóneo para la investigación inmunooncológica, ya que admite los perfiles analíticos más complejos. Además, el sistema NovoSampler Q permite automatizar el proceso y que funcione sin supervisión.
A la derecha se muestra un perfil de inmunofenotipado panleucocitario de leucocitos PBMC obtenido con el sistema NovoCyte Quanteon. Este perfil se diseñó para monitorizar distintos subconjuntos inmunitarios con marcadores de activación y diferenciación.
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Vídeo con consejos sobre aplicaciones
Simplifying Cell Proliferation Studies with Flow Cytometry (Simplificación de los estudios de proliferación celular gracias a la citometría de flujo)
Simplifique los análisis con una solución de software integrado
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Seminario web
A Flow Cytometry Method for Detecting Bacteria in Water (Un método de citometría de flujo para detectar bacterias en el agua)
Stephanie Ting, ingeniera mecánica
Experta en aplicaciones de campo
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Seminario web
Characterizing Potential Biomarkers using xCELLigence and NovoCyte (Caracterización de posibles biomarcadores con sistemas xCELLigence y NovoCyte)
Steve Offer, profesor adjunto de Farmacología
Escuela de Medicina de la Clínica Mayo
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ARNgm Agilent SureGuide obtenidos mediante síntesis química
Los ARN guía de Agilent obtenidos mediante síntesis química facilitan aprovechar todo el potencial de la técnica CRISPR en aplicaciones de ingeniería celular e inmunoterapia.
Estos ARN guía monocatenarios (ARNgm) de cadena larga y gran calidad, obtenidos mediante síntesis química, son idóneos para la ingeniería celular basada en la técnica CRISPR. Gracias a las opciones de personalización, como las modificaciones para incrementar la estabilidad y la especificidad, permiten obtener resultados uniformes y crear procesos innovadores y robustos para el desarrollo de fármacos. La capacidad de fabricación basada en buenas prácticas (GMP), tanto a pequeña escala en instalaciones de investigación como a gran escala, permite disponer de una solución integral para todas sus necesidades de ingeniería celular, desde la investigación hasta los ensayos clínicos, y le aporta calidad, fiabilidad y confianza.
La síntesis de ARNgm de cadena larga y gran pureza resulta posible gracias a reacciones químicas patentadas. Este proceso facilita la fabricación escalable de ARNgm de gran pureza, ofrece exclusivas opciones para el diseño de ARNgm y permite incorporar grupos funcionales en las moléculas para aumentar el rendimiento de la técnica CRISPR/Cas.
Las opciones de personalización ofrecen la posibilidad de incorporar modificaciones para incrementar la estabilidad y la especificidad, y obtener unos resultados más uniformes. Por ejemplo, mediante una única modificación en la posición 5 u 11 de la secuencia del ARN guía de la subunidad beta de la hemoglobina (HBB) se redujo sensiblemente el nivel de actividad colateral y se mantuvo un elevado nivel de actividad en la diana específica.
Seminario web
Improving CRISPR Performance Through Guide RNA Enhancements (Mejora del rendimiento de la técnica CRISPR mediante la mejora del ARN guía)
Mark Dewitt, jefe de proyectos, Corn Lab de la Universidad de California en Berkeley
Dan Ryan, científico de investigación avanzada, Agilent Labs
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Artículo
Improving CRISPR–Cas specificity
with chemical modifications in single-guide RNAs
Ryan, Daniel E. et al., Nucleic Acids Res., enero de 2018, 25; 46(2): 792-803
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Artículo
Novel Modifications and High Purity Guides
Enhance CRISPR Performance
Laurakay Bruhn, bioquímica, Agilent Research Laboratories
Genetic Engineering & Biotechnology News, 577153: 22
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Acelere el desarrollo de terapias con células inmunitarias
¿Desea obtener más información sobre el banco de herramientas de Agilent para terapias con células inmunitarias? Planifique un seminario con nuestros expertos en productos y dé el primer paso para mejorar la función celular y la potencia de sus productos.
Solo para uso en investigación. Prohibido su uso en procedimientos diagnósticos.
